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1 概述
萊克多巴胺ELISA免疫檢測方法用于定量檢測肉中萊克多巴胺的含量。這個(gè)試劑盒也可以檢測其它樣品，但是需要驗(yàn)證。萊克多巴胺是興奮劑的一種。因?yàn)檫@類化合物可以促進(jìn)動(dòng)物脂肪向肌肉轉(zhuǎn)化引起了人們的關(guān)注。萊克多巴胺對豬的影響相當(dāng)明顯，其它種族如牛和魚也表明有相似的效果。很多資料表明興奮劑的濫用導(dǎo)致的人食物中毒。每個(gè)國家的允許的最大檢出限不同。歐洲不允許有殘留。美國對于豬肝是1.2 ppm、肌肉是0.05 ppm。如果需要陽性樣品可以通過HPLC, GC/MS其它 的傳統(tǒng)方法來驗(yàn)證。
2 安全性指導(dǎo)
試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)含有少量的萊克多巴胺。底物中含有TMB。終止液中含有稀硫酸。避免終止液與皮膚和粘膜接觸，如果不小心接觸了請用大量的水沖洗。
3 儲(chǔ)存和穩(wěn)定性
萊克多巴胺ELISA試劑盒應(yīng)該保存在4–8°C。在使用前一定要回復(fù)到室溫（20-25°C）。試劑盒在有效期內(nèi)都可以使用。
4 原理
原理是競爭酶聯(lián)免疫檢測方法。通過萊克多巴胺特異性抗體來識(shí)別萊克多巴胺。樣品中的萊克多巴胺和萊克多巴胺酶結(jié)合物競爭與兔抗萊克多巴胺抗體的結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。萊克多巴胺抗體和包被在微孔板上的二抗結(jié)合。經(jīng)過一個(gè)洗滌步驟加入底物溶液，發(fā)生顯色反應(yīng)（產(chǎn)生藍(lán)色）。藍(lán)色的強(qiáng)度和樣品中萊克多巴胺的含量成反比。進(jìn)過一個(gè)特定的時(shí)間顯色反應(yīng)被終止。用酶標(biāo)儀測定。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中萊克多巴胺的含量。
5 試劑盒的限制和干擾因素
操作不當(dāng)可能導(dǎo)致檢測結(jié)果錯(cuò)誤，比如：試劑盒保存條件不對、錯(cuò)誤的加液順序、試劑的量沒有加準(zhǔn)確、孵育的時(shí)間太長或太短、孵育的溫度太高或太低（低于10°C，高于30°C）。檢測豬肉和牛肉樣品（用下面樣品前處理步驟）的回收率是85-120%。和其它檢測方法一樣對陽性結(jié)果要求通過其它傳統(tǒng)的方法來驗(yàn)證。
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